栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒巢式pcr检测方法的建立

为更好地实现对养殖海区栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒(acuteviralnecrosisvirus,avnv)的快速诊断和分子流行病学的调查,以及avnv的疫情监测,选择avnv全基因组序列中的保守区段,应用accelrysgene2.5软件设计一对巢式引物,用于avnv的检测。结果显示,引物的扩增片段分别为979和548bp。实验优化了pcr体系中mg2+和dntps浓度及扩增程序中的退火温度,并建立了完善的avnv巢式pcr检测技术。研究表明,该pcr检测技术具有较高的敏感性,可稳定检测出5pg扇贝样品组织总核酸中5×10copies的病毒粒子。