奥利亚罗非鱼amh基因结构及其表达

抗缪勒氏管激素(antimullerianhormone,amh)，也称缪勒氏管抑制物质(mullerianinhibitingsubstance,mis)，为肽类生长因子，属于tgfβ生长和分化因子家族。应用rtpcr和race法，从奥利亚罗非鱼精巢组织中分离出amh的cdna。分离到3′utr长为621bp和168bp的两条cdna，除了长度不一，两者之间只存在两个碱基的差别。5′utr为27bp，阅读框为1545bp，翻译成514个氨基酸，其中，amh-n域237个氨基酸，tgfβ域93个氨基酸。同源性分析显示，amh保守性偏低，奥利亚罗非鱼与其它鱼类的相似性为32%~60%，与哺乳类动物只有19%~21%，而tgf-β域的保守性相对较高，与其它鱼类的相似性为54%~72%。基因结构分析显示，奥利亚罗非鱼amh存在6个内含子，和斑马鱼amh结构相似，和人、鼠amh有较大差别，它们缺少奥利亚罗非鱼和斑马鱼amh基因共有的内含子ⅰ和ⅵ。然而，启动子转录因子分析结果表明，奥利亚罗非鱼amh启动子中也存在sry,sf-1,gata-4,sox5,sox9等结合位点。使用taqman探针分析奥利亚罗非鱼amh在成鱼不同组织中的表达以及鱼苗、鱼种、成鱼性腺中的表达量，结果显示amh在成鱼的卵巢、精巢中均有表达，而在脑、肝、肌肉以及心脏中不表达。amh在鱼苗性腺中不表达，在鱼种、成鱼中雄鱼amh表达量显著高于雌鱼，而鱼种雄鱼amh表达量是成鱼雄鱼的10倍。