尼罗罗非鱼雌雄鱼肌肉组织差异表达基因的筛选

应用引物退火控制技术（acp）筛选尼罗罗非鱼雌雄鱼肌肉组织差异表达基因，寻找与雌雄鱼肌肉生长发育相关的候选基因。本实验从同等条件下养殖的尼罗罗非鱼群体中随机选取雌、雄鱼各5尾组成rna池，采用引物退火控制技术，分析了两组个体肌肉组织差异表达基因。利用20对随机引物差异显示扩增，共获得8条ests，其中5个已知的ests分别为转录变体3（loc100691543）、60s核糖体蛋白（rl3）、小白蛋白β样蛋白、肌型肌酸激酶m2-ck和转录因子sox4，其余3个为未知的ests。实时定量pcr分析各差异表达基因在尼罗罗非鱼雌雄肌肉组织中的表达发现，8个差异表达基因中转录变体3与acp6-y在尼罗罗非鱼雄鱼肌肉组织中的表达均极显著高于雌鱼（p<0.01），acp3-x、60s核糖体蛋白（rl3）、小白蛋白β样蛋白、acp15-x、肌型肌酸激酶m2-ck与转录因子sox4在尼罗罗非鱼雌鱼肌肉组织中的表达均极显著高于雄鱼（p<0.01）。结果表明，应用引物退火控制技术筛选获得了8个可能参与了雌雄鱼肌肉生长发育调控的ests，为进一步筛选雌雄鱼肌肉生长发育相关候选基因奠定了基础。