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食品科学 2011
食品中荧光假单胞菌pcr检测体系的建立和评价Keywords: 荧光假单胞菌,gyrb基因,聚合酶链式反应(pcr),检测,食品 Abstract: ?建立用聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,pcr)检测食品中荧光假单胞菌的方法。分别针对16~23srrna基因间隔区序列、gyrb基因以及通过生物信息学方法发掘到的4个种特异性基因设计6对检测引物,通过初步特异性实验,筛选出一对种特异性最佳的引物。最终建立以gyrb基因为检测靶点的pcr扩增体系,并对体系进行系统评价。结果表明:该方法可特异检测荧光假单胞菌的存在,纯dna检测灵敏度为14.9fg/μl(2~3拷贝/μl),纯培养物检测灵敏度为2.8×102cfu/ml。豆奶样品经15h充分增菌可提高检测灵敏度至0.28cfu/25g。
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