苯甲酸人工抗原的合成与免疫效价的测定

通过苯甲酸的衍生物邻苯二甲酸酐(PA)的氨解法将苯甲酸(BA)偶联到载体蛋白上合成苯甲酸的人工抗原：免疫原苯甲酸- 鸡卵清蛋白(BA-OVA)和包被原苯甲酸- 牛血清白蛋白(BA-BSA)。通过紫外光谱扫描、红外光谱扫描及SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法检测鉴定人工抗原，并用免疫原(BA-OVA)免疫BALB/c 小鼠，检测抗体的生成。结果表明，苯甲酸人工抗原的合成成功。根据邻苯二甲酸酐、人工抗原和载体蛋白的紫外吸收值，计算出免疫原中苯甲酸(BA)与载体鸡卵清蛋白(OVA)的偶联比约为174:1。免疫小鼠血清中的抗体通过ELISA法检测为阳性(血清效价达到了1: 3.2 × 105)，表明合成的抗原已诱导出针对苯甲酸的特异性抗体生成，为进一步的苯甲酸单克隆抗体制备和免疫检测提供可靠的免疫原