β-1,3-葡聚糖酶基因克隆、表达及抗菌活性的研究

？通过rt-pcr的方法分别从小麦和水稻的cdna中克隆获得β-1,3-葡聚糖酶基因(glu基因)，分别命名为taglu9507和osglu30。它们的序列分析表明这两个克隆均含一个1002bp的开放阅读框(orf)，编码334个氨基酸，各自的n-端含有一个长20和29个氨基酸残基的信号肽序列。将不含信号肽序列的taglu9507和osglu30编码区dna片段分别克隆进pet28-a(+)表达载体，并转入大肠杆菌bl21(de3)，经0.5mmol/liptg诱导3h后获得了高量表达，表达量分别占大肠杆菌可溶性蛋白的49.7%和26.7%，表达产物对黑曲霉、酵母等真菌生长均有较为明显的抑制作用。本结果更进一步表明β-1,3-葡聚糖酶基因是植物真菌病防治的潜在目的基因群之一。