食品中三种致病李氏菌MPCR-DHPLC检测方法的建立

应用复合PCR(multiplex PCR，MPCR)结合变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquid chromatography，DHPLC)技术建立食品中单核细胞增生李斯特菌、绵羊李斯特菌和英诺克李斯特菌的快速高通量检测方法。根据单核细胞增生李斯特菌、绵羊李斯特菌和英诺克李斯特菌的特异基因序列分别设计引物，MPCR扩增的产物经DHPLC 技术进行快速检测。以94 株参考菌株做特异性实验，并开展了重现性检测实验。MPCRDHPLC方法同步检测到单核细胞增生李斯特菌、绵羊李斯特菌和英诺克李斯特菌的特异性阳性吸收峰，未检测到李斯特菌属其他近源种和非近源种参考菌株的阳性吸收峰，且重现性良好。该方法具有很好的特异性，可以快速、准确、高通量地检测食品中单核细胞增生李斯特菌、绵羊李斯特菌和英诺克李斯特菌，是食品微生物快速检测的新技术