藻蓝蛋白酶解肽的分离纯化及其细胞毒活性

研究钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)藻蓝蛋白(C-phycocyanin，C-PC)及其胰蛋白酶水解肽的分离纯化。采用反复冻融和超声破碎法破碎细胞，用28～55g/100mL硫酸铵沉淀反复盐析获得纯度(A620nm/A280nm)为2.19的藻蓝蛋白，再通过羟基磷灰石(HA)柱层析和Sephacryl S-200 HR凝胶层析对其进行纯化，得到纯度(A620nm/A280nm)为3.89藻蓝蛋白。纯化后的藻蓝蛋白在40℃条件下经胰蛋白酶酶解60min后，用DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析对酶解肽产物进行分离，收集得到4组藻蓝蛋白酶解肽。采用MTT方法，研究藻蓝蛋白、酶解混合液、分离的4个酶解肽组分对肿瘤细胞系HeLa和293T增殖的影响。结果显示：肽组分1和4对HeLa细胞的抑制率分别为37.71%和47.04%，而混合肽和藻蓝蛋白抑制率分别为34.02%和26.03%，因此活性肽组分1和4显示出较好的肿瘤抑制效果，而这两种活性肽组分对正常细胞293T并无细胞毒活性，特别是组分4效果最明显，是极具开发潜力的保健产品