植物乳杆菌KLDS1.0391所产细菌素的纯化

目的是为了分离纯化植物乳杆菌KLDS1.0391代谢产生的细菌素。采用蛋白质层析技术分离细菌素，采用质谱测定纯化后细菌素的分子量。经过实验比对，最终确定的分离纯化路线为：植物乳杆菌KLDS1.0391的无细胞上清液首先经过饱和度为70%的硫酸铵沉淀，收集的沉淀溶于1/40体积0.02 mol/L的乙酸钠缓冲液(pH 6.5)，复溶后的样品采用SP Sepharose fast flow阳离子填料和COLUMN XK 16/20层析柱进行阳离子纯化，之后采用SOURCE 15RPC ST 4.6/150进行反相纯化。对收集到的具有抑菌活性的样品经高效液相色谱检测，判断其纯度达到质谱分析要求，经Tricine-SDS-PAGE检测，初步判定其分子量约为2000 kDa。采用质谱MALDI-TOF测定该细菌素的分子量为1770 kDa