重金属镉单克隆抗体的制备与性质分析

通过双功能螯合剂iEDTA螯合Cd2+并偶联卵白蛋白(OVA)和牛血清白蛋白(BSA)，合成免疫抗原Cd-iEDTAOVA和筛选抗原Cd-iEDTA-BSA；以Cd-iEDTA-OVA注射BALB/c小鼠，制备Cd2+单克隆抗体，以Cd-iEDTA-BSA通过酶联免疫吸附法(ELISA)进行筛选，并分析抗体性质。结果表明：以Cd2+和OVA含量分别为174.6230μg/L、1.7892mg/mL的Cd-iEDTA-OVA抗原免疫小鼠，Cd2+和BSA含量分别为48.1881μg/L、1.8065mg/mL的Cd-iEDTA-BSA抗原筛选，可获得7F4和7E8两株特异性较好的杂交瘤细胞；7E8E5、7E8G9、7F4B8、7F4D6和7F4H8共5株高纯度单抗，均属IgG1型，其中7E8E5效价最高，达1:512000，亲和常数也最高，达4.55×108 L/mol。建立了Cd2+间接竞争ELISA法，IC50为1150ng/mL，检测限为260ng/mL (R2 = 0.9916)；与Hg2+有较强交叉，与Zn2+、Cu2+、Ca2+交叉较弱，与Mg2+、Ni2+、Al3+、Pb2+、Ba2+几乎无交叉