费氏弧菌β-内切葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学分析

？以费氏弧菌（vibriofischeri）em17基因组dna为模板，通过pcr方法克隆了该菌的β-内切葡聚糖酶基因（genbankaccessionnumber:ef533943）。将其插入到表达载体pgex-6p-1中，转化大肠杆菌bl21（de3），诱导表达。测序结果经dnaman软件分析，该基因与genebank中费氏弧菌es114基因组预测的β-内切葡聚糖酶基因同源性达到97.1％，但与genebank中其他β-内切葡聚糖酶基因同源性较低。酶学性质研究表明，该酶的最适反应温度为60℃，最适反应ph值为9.0。同时研究了6种金属离子对该酶活性的影响，结果显示该酶活性依赖金属离子的存在mg2+，ca2+对酶有激活作用，mn2+,pb2+则严重抑制该酶的活性。