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农业生物技术学报 2007
镉诱导的蚯蚓全长cdna文库的构建与初步鉴定Keywords: 镉,耐受性,赤子爱胜蚓,cdna文库,鉴定 Abstract: ?采用人工土壤法,研究重金属镉(cd2+)对成熟赤子爱胜蚓(eiseniafetida)的急性毒性,表明蚯蚓对镉具有较强的耐受性。trizol法提取蚯蚓rna后,采用clontech公司的creatortmsmarttmcdna文库构建试剂盒,成功构建了低剂量cd2+(200mg?kg-1)诱导的蚯蚓cdna文库,其库容量为3.02×105pfu/ml,扩增后滴度为8.67×109pfu/ml,重组率为97.3%,绝大多数的cdna插入片段≥0?5kb,平均长度≈1?0kb。所够建的cdna质粒文库容量及插入片段大小符合合格文库要求,为进一步筛选蚯蚓体内解毒、免疫相关基因,寻找生物标志物奠定了基础。
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