马白细胞介素-18单克隆抗体的制备及其特性的初步鉴定

？：利用纯化的用原核系统表达的重组马白细胞介素-18成熟蛋白(pet-meil-18)抗原免疫balb/c小鼠，取脾细胞与sp2/0骨髓瘤细胞进行融合，同时以昆虫杆状病毒表达系统获得的马白细胞介素-18成熟蛋白(meil-18)作为抗原进行间接elisa检测，筛选并最终得到了9株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株。利用ifa试验对9株单克隆抗体进行鉴定，结果证实所获得的9株细胞分泌的抗体都是针对meil-18的特异性抗体。将此9株单克隆抗体分别与用原核系统分段表达的重组马白细胞介素-18成熟蛋白pet-meil-18-(1)(meil-181～78位氨基酸残基)和pet-meil-18-(2)(meil-1879～157位氨基酸残基)蛋白进行特异性elisa检测，结果表明，9株单克隆抗体有5株识别表达的pet-meil-18-(1)(meil-181～78位氨基酸残基)，而另外4株单克隆抗体与pet-meil-18-(2)(meil-1879～157位氨基酸残基)发生反应，说明所获得的9株单克隆抗体至少针对pet-meil-182个或2个以上不同的抗原表位。单克隆抗体亚型鉴定试剂盒的鉴定结果显示，除m1f11、m3a11和n7d9为igm，其余的单克隆抗体均为igg1，而且所有单克隆抗体的轻链均为?资链。