含csfvt细胞表位的猪细小病毒样颗粒的表达及小鼠试验免疫研究

？：纯化的重组子pm-vp2-e290阳性质粒，与bac-n-bluedna共转染昆虫细胞sf9，通过同源重组，形成具有感染活性的重组杆状病毒，并利用重组病毒的lacz表型进行噬斑纯化。纯化后的高效价重组杆状病毒在昆虫细胞中进行表达，表达产物应用sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sds-page）、免疫印迹（western-blot）和免疫酶斑点技术（dot-elisa）进行分析，确定所表达的蛋白分子量大小约为67kd，且具有天然蛋白的抗原特异性。应用免疫电镜对表达产物进行观察，可见到细小病毒样颗粒。病毒样颗粒在无免疫佐剂参与的情况下，免疫6-8周龄的balb/c小鼠，同时设ppv的灭活疫苗免疫组及pbs接种组作为参比对照，检测小鼠的细胞免疫和体液免疫学指标。结果表明，表达蛋白所形成的细小病毒样颗粒，不仅能诱导小鼠机体产生抗csfv的特异性ctl反应，还能刺激小鼠产生高效价的抗ppv的特异性抗体。而且机体所产生的抗体效价显著高于灭活疫苗对照组。