β-葡聚糖酶的热稳定性改造及酶学性质分析

？为了获得热稳定性有所提高的β-葡聚糖酶，本研究利用定向进化技术对β-葡聚糖酶基因进行改造，并对野生酶和突变酶的酶学性质进行研究。结果获得了两株热稳定性有所提高的突变体，分别命名为egs1和egs2；酶学性质分析结果显示：与野生酶相比，egs1和egs2突变酶的tm值分别提高了3℃和5℃，达到了65.5℃和67.5℃；突变酶的最适反应温度也提高了5℃，达到了60℃；两个突变酶对地衣多糖的水解能力分别被提高28％和降低21.6％；对地衣多糖的亲和力未见改变；野生酶和egs1突变酶的最适ph值为6.5，而egs2突变酶的最适ph值为7.0；野生型和突变型？-葡聚糖酶都有较宽的ph稳定范围，在ph6.0-8.5的范围内放置48小时，仍保持80％以上的酶活力；遗传稳定性检验结果表明突变株的遗传稳定性良好。这一结果说明了定向进化在改善酶性质方面是比较有效的策略。