花生二氢黄酮醇还原酶基因(dfr)的克隆及表达分析

？二氢黄酮醇还原酶(dihydroflavonol4-reductase,dfr)是植物花青素合成过程中的关键酶，催化二氢黄酮醇生成无色花青素。本研究利用花生(arachishypogaeal.)未成熟种子cdna文库，通过大规模est测序，从花生中克隆了dfr基因的全长cdna序列。序列分析表明，花生dfr蛋白氨基酸序列与其他植物来源的dfr有很高的同源性。利用花生cdna芯片和半定量rt-pcr方法对花生dfr基因表达模式的研究发现，dfr基因在果针中表达水平最高，其次是花，在根和叶中有微量表达；不同种皮颜色花生品种的种子中表达差异明显，随种皮颜色的加深，dfr基因表达增强，在中花9号黑色种子中表达量最高。对茎叶紫色花生种质材料的研究表明，在紫色组织中dfr基因表达较强。结果表明dfr表达量与花青素积累量呈正相关，说明dfr催化反应是花青素合成途径的关键步骤。