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农业生物技术学报 2014
利用rna沉默抑制子hc-pro提高基因表达的策略, PP. 816-824 Keywords: 瞬时表达,基因沉默抑制子,蚜传辅助因子(hc-pro),绿色荧光蛋白 Abstract: ?利用植物生物反应器生产药用蛋白具有独特的发展优势,但外源基因在受体内会发生基因沉默现象而影响基因的表达。由于基因沉默抑制子能有效抑制外源基因的沉默反应,本研究利用沉默抑制子蚜传辅助因子(helpercomponent-proteinase,hc-pro)转基因烟草有效提高了外源基因的表达。采用叶片注射法将携带表达载体p35s-30b-gfp的农杆菌(agrobacteriumtumefaciens)重悬液分别侵染野生型烟草(nicotianabentamiana)和hc-pro转基因烟草(n.bentamiana),通过蛋白电泳检测和westernblot检测技术对绿色荧光蛋白(gfp)表达进行比较。研究结果表明,与野生型烟草nb相比,hc-pro转基因烟草中gfp的表达水平显著增加。本研究为基因沉默抑制子在植物生物反应器中的应用提供了理论依据。
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