牡丹实时定量pcr分析中内参基因的选择

？实时荧光定量pcr(qpcr)是目前研究基因定量表达的重要方法，根据特定实验材料及条件选择qpcr分析中合适的内参基因对于准确校正目的基因的表达至关重要。本研究以牡丹(paeoniasuffruticosaandr.)不同组织(根、茎、叶和花瓣)、切花开放不同时期及不同处理(乙烯或葡萄糖处理)的花瓣为材料，利用qpcr技术探讨了5种常用看家基因：β-微管蛋白基因(β-tubulin)、泛素基因(ubiquitin)、甘油醛-3-磷酸-脱氢酶基因(gapdh)、肌动蛋白基因(actin)及18s核糖体rna(18srrna)的表达情况，各看家基因均能特异扩增并显示较高的扩增效率。经genorm和normfinder程序统计学计算处理，综合分析结果显示，在牡丹不同组织或切花开放不同时期花瓣中，ubiquitin表达最为稳定；在不同处理的切花花瓣中，gapdh表达最为稳定，二者分别适宜作为相应条件下的内参基因。本研究认为，各实验条件下使用ubiquitin和gapdh两个表达最稳定的基因组合，即可获得更为精确的基因表达结果。本研究结果对牡丹中关键基因的定量表达分析具有重要的实用价值。