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农业生物技术学报 2015
埃及伊蚊galectin12基因的克隆、表达及杀虫活性测定, PP. 1421-1429 Keywords: 埃及伊蚊,克隆,表达,galectin12 Abstract: ?凝集素属于β-半乳糖苷结合蛋白家族,广泛存在于昆虫的体内,对其免疫调控起重要作用,研究埃及伊蚊(aedesaegypti)中的凝集素具有重要理论意义。本研究以埃及伊蚊凝集素galectin12基因序列设计引物,通过qrt-pcr扩增获得埃及伊蚊凝集素galectin12基因片段,将其连接到pmd-18t克隆载体,筛选阳性克隆子进行酶切以及测序验证,根据酶切位点将目的基因片段连接到pet-32a载体进行原核表达,获得23kd的目的蛋白,并采用his酶亲和层析技术对目的蛋白进行纯化,获得纯化蛋白,并进行生物活性测定,结果表明,galectin12能够抑制bt对蚊虫的毒力。研究结果为进一步验证凝集素参与埃及伊蚊抵御btcry毒素过程的机理奠定分子基础。
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