转北美海蓬子胆碱单加氧酶基因(cmo)烟草的获得及耐盐性鉴定

？胆碱单加氧酶(cholinemonooxygenase,cmo)是植物甜菜碱合成过程中重要的限速酶。为探讨转北美海蓬子(salicorniabigelovii)cmo基因烟草(nicotianatabacum)在耐盐基因工程中的应用，利用基础质粒pcambia1300ur构建pcambia1300ur-cmo植物表达载体，通过电击法将重组质粒导入农杆菌(agrobacteriumtumefaciens)eha105中，并采用农杆菌介导的叶盘转化法转入烟草，经抗生素筛选、pcr和qrt-pcr检测后，对阳性烟草植株进行耐盐性鉴定。结果表明，北美海蓬子cmo基因在烟草中具有80%的转化效率，在200mmol/l盐胁迫下，转基因植株的超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,sod)、过氧化物酶(peroxidase,pod)、过氧化氢酶(catalase,cat)及脯氨酸(proline,pro)含量明显高于非转基因的烟草植株，而丙二醛(malondialdehyde,mda)含量和过氧化氢(hydrogenperoxide,h2o2)含量则低于非转基因组。结果表明，cmo基因的转化提高了烟草的耐盐性，为进一步阐明cmo基因在植物体内的甜菜碱合成代谢途径、抗逆调控机制及培育耐盐植物新品种提供基因资源库和理论参考。