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农业生物技术学报 2015
cd4分子在牦牛主要淋巴器官的表达, PP. 1167-1177 Abstract: ?cd4分子是辅助性t淋巴细胞表面的重要标志,广泛参与t细胞受体对主要组织相容性复合物ⅱ(majorhistocompatibilitycomplexⅱ,mhcⅱ)分子递呈抗原的识别和信号传递,与细胞免疫应答和防御机制紧密相关。本研究采用rt-pcr方法克隆牦牛(bosgrunniens)cd4的开放阅读框,通过实时荧光定量pcr(quantitativereal-timepcr,qrt-pcr)、westernblot及免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物技术(streptavidinbiotin-peroxidasecomplexmethod,sabc)检测成年牦牛的主要免疫器官(胸腺、脾、肠系膜淋巴结及血结)内cd4mrna及蛋白的表达。rt-pcr反应扩增得到牦牛cd4mrna序列编码区长为1188bp,编码396个氨基酸,与黄牛(bostaurus)有较高的同源性。qrt-pcr和westernblot检测结果显示,cd4mrna及蛋白在各淋巴器官中均有表达,且在胸腺表达量最高,肠系膜淋巴结、血结次之,脾表达量最低(p<0.01)。免疫组织化学结果显示,cd4阳性细胞在胸腺皮质、髓质均有分布;在脾主要分布在动脉周围淋巴鞘和红髓髓索;在肠系膜淋巴结及血结内,则主要分布在淋巴小结周边及髓索。结果提示,牦牛胸腺是cd4阳性t淋巴细胞主要的输出器官,其输出量可能影响次级淋巴器官内t细胞含量;血结可能与淋巴结及脾一样,在细胞免疫发挥同等重要的作用。本研究为牦牛免疫遗传学和免疫生物学等相关研究奠定基础,同时也将为适时免疫、致病机理和疾病防治等研究提供新的资料。
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