中国樱桃实时定量pcr(qrt-pcr)内参基因的筛选与鉴定

？中国樱桃(prunuspseudocerasus)是一种重要的落叶果树，为了丰富稳定可靠的内参基因，提高实时定量pcr(quantitativereal-timepcr,qrt-pcr)分析中国樱桃基因表达的准确性，本研究在分析中国樱桃花芽转录组数据的基础上，筛选了表达稳定的微管蛋白(tubulin,tub)、β肌动蛋白(β-actin,actb)、甘油醛-3-磷酸-脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase,gapdh)、延伸因子1β(elongationfactor1β,ef1b)、泛素接合酶(ubiquitin-conjugatingenzyme,ubce)、18srrna和翻译起始因子5a(translationinitiationfactor5a,tif5a)7个看家基因，分别利用genorm、bestkeeper、normfinder和deltact等计算方法分析了上述基因在4℃、nacl(300mmol/l)和脱落酸(aba)(100mmol/l)处理下以及低温诱导花芽休眠解除过程中的表达稳定性。综合分析结果表明，gapdh在4℃和nacl处理下最稳定，而actb和ubce分别在aba处理和花芽休眠解除过程中最稳定，说明gapdh可以作为中国樱桃低温响应和盐碱胁迫处理的内参基因，actb和ubce可以作为aba处理和花芽休眠解除过程中的内参基因。本研究结果为研究中国樱桃不同生理过程中目的基因表达提供了稳定可靠的内参基因，具有重要参考价值。