共表达与牛疱疹病毒1型vp22融合的猪繁殖与呼吸综合征病毒e及m蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其免疫原性观察

？为了研制猪繁殖与呼吸综合征病毒（prrsv）基因工程疫苗，以伪狂犬病毒（prv）ge基因缺失标志疫苗株tk-/ge-/lacz+为病毒载体，通过同源重组，构建了共表达与牛疱疹病毒1型vp22（bhv-1vp22）融合的prrsve及m蛋白的重组伪狂犬病毒（rprv）tk-/ge-/vp22e+/vp22m+。经pcr、southernblot、westernblot证实rprv构建正确,并能表达与bhv-1vp22融合的prrsve及m蛋白。rprv在ibrs-2、pk-15细胞中的增殖滴度与prv亲本株相比无显著差异，表明外源基因的插入不影响rprv增殖。用该rprv免疫balb/c小鼠，检测免疫小鼠抗prrsv中和抗体及脾淋巴细胞增殖反应，并与未融合vp22的单表达prrsve蛋白及共表达e及m蛋白的rprvtk-/ge-/e+与tk-/ge-/e+/m+进行比较。结果显示tk-/ge-/vp22e+/vp22m+可诱导小鼠产生更好的体液与细胞免疫反应，bhv-1vp22发挥了佐剂效应。本研究为研制安全、有效的猪繁殖与呼吸综合征-伪狂犬病二价基因工程疫苗奠定了基础。