b型副鸡嗜血杆菌血凝素基因的克隆表达及生物活性鉴定

？血凝素是副鸡嗜血杆菌（haemophilusparagallinarum,hpg）的主要抗原成分之一，鸡只对hpg的免疫力与血凝素抗体滴度成正相关。根据genbank上已发表的b型hpgdalian株的血凝素基因序列（ay622378），设计合成了1对特异扩增hpg血凝素基因的引物。以大连分离株hpg中提取的细菌dna为模板，利用pcr扩增出了1038bp的血凝素基因，将其克隆到pet-32a载体上，构建了pet-ha原核表达质粒并在bl21大肠杆菌中过量表达。血凝试验显示纯化的重组蛋白具有血凝活性；western试验证明该重组蛋白可以被b型hpg特异性鸡血清所识别。本研究在国内首次对hpg的血凝素基因进行克隆表达，并分析了重组蛋白的血凝活性。