鹅β-防御素基因克隆与生物学特性的初步分析

？本试验采用rt-pcr方法，从鹅的骨髓细胞中扩增到禽β防御素（avbd）基因。测序结果表明，该基因的cdna大小为201bp，编码66个氨基酸。经遗传进化分析发现，该基因推导的氨基酸序列与鸡avbd5的同源性最高，达84.8%。因此，将其命名为鹅avbd5。进一步将该基因定向插入到pgex-6p-1的ecorⅰ和salⅰ双酶切位点上，构建pgex-avbd5重组表达质粒。将重组质粒转化大肠杆菌bl21，于37℃不同时间进行诱导表达，sdspage检测外源基因的表达情况。结果表明，重组鹅avbd5融合蛋白的分子量约为32ku，重组蛋白以包涵体形式存在。采用菌落计数法进行抗菌活性测定，结果表明，重组鹅avbd5有广谱的抗菌活性，对11种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有较强抗菌作用。此外，该蛋白对温度和ph有较高的稳定性。