新霉素阻断elisa试剂盒的研制与应用

？本研究旨在建立新霉素（neomycin，neo）免疫学检测试剂盒。以制备的抗neo单克隆抗体(neomab)为基础，建立阻断elisa分析方法，组装新霉素阻断elisa试剂盒，并对试剂盒的性能进行鉴定。结果表明，neo试剂盒(neo-kit)标准曲线呈典型的s型，符合4参数logit曲线拟合，相关系数r2=0.9903；检测范围为1.0~64.0μg·l1，半数抑制浓度(ic50)为2.59μg·l1，灵敏度为0.75μg·l1，检测限为1.0μg·l1。试剂盒除了和neo阳性样品反应呈阳性外，与庆大霉素、链霉素、土霉素、沙丁胺醇、环丙沙星、二氟沙星、磺胺嘧啶及磺胺甲噁唑等其他药物均无交叉反应性。奶样、饲料样及肉样的平均添加回收率为89.50%、89.58%和87.92%；平均批内和批间变异系数均小于15%，而且批间变异系数小于批内变异系数；基质对neokit的检测结果影响比较小；neokit在4℃可保存6个月以上。试剂盒和hplcmsms对牛奶中新霉素回收率没有显著差异（p≥0.05）。试剂盒和hplcmsms对饲料样检测结果也无显著差异（p≥0.05）。本研究成功研制出敏感、特异、准确的neo检测试剂盒。