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牲畜兽医学报 2012
免疫复合物对猪繁殖与呼吸综合征病毒诱导的pam细胞因子转录的影响Keywords: ?prrsv,免疫复合物,ifn-α,il-10,tnf-α Abstract: ?本试验通过研究免疫复合物影响猪繁殖与呼吸综合征病毒(prrsv)在巨噬细胞内增殖的因素,来进一步探讨免疫复合物经fcγr介导的prrsv感染机制。本研究将含200tcid50prrsv病毒液与等体积的终浓度为1.30mg·ml-1的猪igg-兔抗猪igg复合物分别先后和同时接种于pam细胞,分别于12、24、36、48h收集细胞液,同时设prrsv感染对照组、免疫复合物对照组和健康细胞对照组,利用建立的相对荧光定量pcr和绝对荧光定量pcr方法分别检测巨噬细胞中ifn-α、il-10和tnf-α的mrna转录水平及prrsv的rna水平,并进行定量分析,同时采用elisa方法检测健康细胞中ifn-α的蛋白水平。结果显示,在感染后12~36h期间,免疫复合物能够抑制prrsv诱导的ifn-α的mrna水平,tnf-αmrna水平在感染后12h被促进,而在24~36h期间被抑制。在感染后48h,免疫复合物能促进ifn-α和tnf-α的mrna水平,而在12~48h期间均能抑制il-10的mrna水平,此外,免疫复合物在感染12、24和36h时间段内均能明显促进病毒的增殖,但在48h后不显著。健康细胞中ifn-α的蛋白水平在培养12~48h之内呈“降-升-降”的趋势。结果表明,ifn-α蛋白的表达与其mrna的转录不同步。在prrsv感染初期,免疫复合物能抑制prrsv诱导的抗病毒因子的mrna水平,病毒的复制被促进,而在感染后期,抗病毒因子达到一定的浓度后发挥抗病毒作用,在一定程度上抑制病毒的复制。而tnf-α的转录规律不明显,表明免疫复合物可能同时与激活型和抑制型fcγr结合来共同调节prrsv诱导的细胞因子的转录。
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