应用表达微小隐孢子虫p23的重组干酪乳杆菌建立微小隐孢子虫ifat诊断方法

？本试验旨在建立ifat和间接elisa方法作为微小隐孢子虫病诊断方法。应用dna重组技术，构建原核表达载体pgex-p23，经iptg诱导表达出gst-p23融合蛋白，并进行纯化，将该重组融合蛋白作为包被抗原，建立elisa诊断方法；同样构建重组载体pmg-p23，用电转化方法将其转入干酪乳杆菌中，称为重组活干酪乳杆菌（含pmg-p23），以此为已知抗原，建立ifat诊断方法。应用elisa和ifat方法检测来自内蒙古地区的508份牛血清、187份绵羊血清和197份山羊血清：其中elisa方法在各种动物血清中阳性率依次分别为0.59%、5.88%和4.57%，而ifat方法则为0.19%、5.88%和4.57%。2种检测方法阳性符合率在牛血清样品中为33.33%，在绵羊和山羊中则均为100%。试验结果表明，重组抗原p23具有良好的反应原性，2种诊断方法的结果基本吻合，显示出良好的一致性和敏感性，可在微小隐孢子虫病的诊断实践中推广应用。