asia1型口蹄疫病毒含rsd受体识别位点感染性克隆的构建与病毒拯救

？口蹄疫病毒（foot-and-mouthdiseasevirus,fmdv）具有高的突变率和很强的适应性，在环境条件变化时会迅速从准种种群中选择变异株来适应新的环境，这些变异株包括在rgd受体结合基序内部或附近氨基酸的替换。fmdvasia1/js/china/05株经不同宿主传代后产生含rsd和rdd受体识别基序的变异株，为了研究含rdd受体识别基序的fmdv在受体结合位点内1个氨基酸的变化是否影响感染性病毒子的产生，作者利用已构建的含rdd受体结合位点的fmdvasia1/js/china/05株的全长感染性cdna克隆为骨架，采用融合pcr方法，构建了该毒株含rsd受体位点的全长cdna克隆pfmdv-rsd。线性化的pfmdv-rsd重组质粒和表达t7rna聚合酶的真核质粒pcdnat7p共转染bhk-21细胞，56h后可观察到典型的fmdv致细胞病变效应。对收获的病毒分别进行序列测定、间接免疫荧光试验、电子显微镜观察和乳鼠致病性分析，结果证实该毒株细胞受体位点1个氨基酸的替换不影响活病毒的拯救。该试验为进一步研究含rsd受体结合位点fmdv的生物学特性奠定了基础。