牛囊胚icm克隆多能性标记基因与表面标记的研究

？本研究旨在探究牛类胚胎干细胞（embryonicstemcells，es）的多能性标记基因与表面标记，为优化牛类es细胞培养条件和相关研究提供依据。利用2i/lif培养液，通过全胚接种及机械传代法分离培养牛囊胚内细胞团（innercellmass，icm），免疫荧光染色法检测其多能性标记基因与表面标记；qrt-pcr检测免疫磁珠法分选的牛囊胚icm和滋养层细胞（trophectodermcell，te）的多能性标记基因的差异表达结果。试验成功分离出了牛囊胚icm克隆，并体外培养至第10代，且各代克隆均呈现出了典型的干细胞形态。结果表明，icm表面标记ssea1、ssea4和tra-1-60染色为阳性，且多能性标记基因oct4、sox2和nanog在其中均有表达；oct4、sox2和nanog在牛囊胚icm和te中的表达存在差异（p<0.05），其中sox2的差异极显著（p<0.01）。综上表明，2i/lif培养液有助于牛囊胚icm的培养；sox2可能成为牛icm克隆的候选多能性标记基因。