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牲畜兽医学报 2014
5-aza-dc体外诱导兔骨髓间充质干细胞分化为胰岛细胞的研究, PP. 1538-1543 Keywords: 兔,骨髓间充质干细胞,5-aza-dc,dna甲基化,pdx-1,胰岛细胞 Abstract: ?为探讨dna甲基化水平变化与bmscs分化的关系,采用mtt法检测不同浓度的dna甲基化抑制剂5-aza-dc作用不同时间对细胞活力的影响,用1.0μmol?l-1的5-aza-dc处理bmscs,并联合dmso、尼克酰胺诱导bmscs向胰岛细胞分化,与未作dna酶甲基化抑制剂处理的dmso法诱导组进行双硫腙染色对比、胰岛关键调控基因pdx-1的免疫细胞化学荧光染色鉴定对比。研究表明,0.2~1.0μmol?l-15-aza-dc为处理兔bmscs合适的浓度,1.0μmol?l-1的5-aza-dc与dmso、尼克酰胺诱导剂的联合使用,能够促进胰岛调控关键基因pdx-1的表达,建立了bmscs向胰岛细胞分化的较为高效的诱导体系。揭示了甲基化程度影响bmscs向胰岛细胞的分化,低甲基化程度促进胰岛特异基因pdx-1的表达。
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