牛体细胞核移植中meg8基因dna甲基化及印迹状态分析

？为了确定meg8基因内部cpg岛的甲基化在调控meg8基因印记中的可能作用，本研究应用亚硫酸盐测序法分析meg8基因内含子3上的17个cpgs位点等位基因特异的dna甲基化状态。结果发现，2条亲本链的甲基化程度都比较高（>80%），但t链甲基化水平显著高于c链（p<0.05），并且c链只有1种甲基化模式。分析meg8基因在出生后48h死亡的体细胞核移植牛肺中的甲基化和印迹状态，发现meg8基因甲基化水平在核移植牛和自然繁殖牛中都比较高，但核移植牛的甲基化程度显著高于正常繁殖牛（p<0.05），并且只有1种完全甲基化的模式，而meg8基因在核移植个体中的印记表达没有紊乱，仍表现为单等位基因表达，初步推测meg8内含子3cpgs岛的甲基化可能没有参与调控meg8基因的印记表达。