雌激素对鸡胚bmscs诱导的成骨细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

？本试验建立鸡胚骨髓间充质干细胞（bmscs）体外培养及其诱导成骨细胞方法，以探讨雌激素对bmsc诱导的成骨细胞的影响。以全骨髓进行体外贴壁培养、传代，取第3代细胞进行成骨细胞诱导培养，用倒置显微镜观察其形态，mtt法测定细胞增殖率，流式细胞仪检测细胞周期率。通过碱性磷酸酶、van-gieson及茜素红染色等方法进行成骨细胞鉴定。将诱导的成骨细胞分为5个试验组，分别添加10-7、10-8、10-9、10-10和10-11mol·l-1浓度的17β-e2于成骨细胞诱导培养基，并设置对照组。用mtt法和pnpp法测定不同浓度17β-e2对诱导成骨细胞增殖和分化的影响，判断其最有效浓度。并用该有效浓度作用于诱导培养的成骨细胞，通过流式细胞术观察该浓度17β-e2对诱导的成骨细胞凋亡的影响。结果表明，鸡胚全骨髓贴壁培养法可获得bmscs，经典培养基诱导培养获得的细胞具有成骨细胞典型的生物学特征，其alp、i型胶原及钙化结节染色均为强阳性。10-9mol·l-117β-e2可促进诱导的成骨细胞增殖、分化，抑制其凋亡。经纯化处理的鸡bmscs可诱导成骨细胞，且雌激素可提高bmscs诱导的成骨细胞功能。