纤连蛋白对人外周血单核细胞TLR4介导的脂多糖反应的影响

目的？研究纤连蛋白（Fn）刺激对人外周血单核细胞（PBMCs）炎症因子释放和Toll样受体4（TLR4）表达的影响。方法？？？采用梯度离心法从浓缩人外周血白细胞中分离出PBMCs，设立空白对照组、Fn刺激组、LPS刺激组以及Fn+LPS复合刺激组，分？别刺激PBMCs0.5、2、4、8、12h后收集细胞培养上清，采用酶联免疫法（ELISA）检测其炎症因子人白介素6（IL-6）、人白介素10（IL-10）？及肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平;采用Westernblotting法检测各刺激物对TLR4表达的影响。结果？4、8h复合刺激组IL-6释放量？分别为727.00±37.73和918.25±26.78pg/ml，明显高于同时间点其他3组（P<0.05）;2h复合刺激组TNF-α释放量明显增加，且高？于同时间其他3组（P<0.05）;0.5、2、4h复合刺激组IL-10释放量呈缓慢递增，8、12h分别达784.74±91.96、1081.74±57.98pg/ml，与？同时间其他3组比较明显增加（P<0.05）。Westernblotting结果显示，1、2h复合刺激组TLR4的表达水平明显高于各时间点的其他？3组（P<0.05）。结论？单纯Fn或LPS刺激即可促进PMBCsTLR4表达上调，Fn复合LPS刺激可进一步增强TLR4的表达，并导？致炎症介质IL-6、TNF-α释放的显著增加，提示Fn可增强PMBCs对LPS刺激的敏感性。