细胞因子对小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌的影响

［摘要］目的？研究外源性肿瘤坏死因子β（TGF-β）、白细胞介素（IL）-6和IL-23对小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌？的影响，并初步探讨其在器官移植免疫中的调节机制。方法？？用佛波酯（PMA）和离子霉素（Ion）刺激小鼠脾单个核细胞4h，将细胞？因子与脾单个核细胞共培养72h，根据加入细胞因子的不同，将培养细胞分为空白对照组、TGF-β组、TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6？+IL-23组。流式细胞术分析各组Th17细胞比例，半定量RT-PCR检测各组细胞核孤儿受体mRNA（RORγtmRNA）和IL-17mRNA？的表达变化，ELISA测定各组细胞培养上清液中IL-17蛋白浓度。结果？？空白对照组及TGF-β组未见Th17细胞和RORγtmRNA？的表达，TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组Th17细胞比例差异具有统计学意义（0.30%±0.14%vs0.51%±0.11%，P<？0.01），RORγtmRNA的表达差异具有统计学意义（0.217±0.038vs0.458±0.127，P<0.01）。空白对照组与TGF-β组IL-17mRNA？表达强度差异无统计学意义（0.868±0.222vs0.799±0.205，P>0.05），IL-17蛋白浓度差异无统计学意义（90.04±22.56pg/mlvs？？125.38±27.58pg/ml，P>0.05），TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17mRNA差异具有统计学意义（1.396±0.359vs2.415？±0.604，P<0.01），TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17蛋白浓度差异具有统计学意义（973.32±217.33pg/mlvs1498.46？±317.27pg/ml，P<0.01）。TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17mRNA表达强度、IL-17蛋白浓度均高于空白组与TGF-β？组（P<0.01）。结论？？TGF-β+IL-6在体外能促进小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌，IL-23能明显增强这种作用。