免疫反应性及与不同血清群交叉反应性的Westernblotting评价

目的？研究钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32与致病性钩体抗体的免疫反应性以及与不同钩体血清群之间的交叉反应？性，为钩体病的血清学检测提供抗原。方法？？依据黄疸出血群赖型56601株外膜脂蛋白LipL32基因序列设计引物，扩增出该基因片？段DNA，将其克隆至表达载体pET-28a中。将构建好的重组质粒转化大肠埃希菌BL21并诱导表达，表达的重组蛋白纯化后采用？Westernblotting评价其与56601株及其他14个血清群致病性钩端螺旋体抗体的免疫反应性和交叉反应能力。结果？？扩增获得了？56601株脂蛋白LipL32基因，成功构建了原核表达重组质粒pET28a-LipL32。重组蛋白rLipL32为包涵体表达，且与56601株及另外？14个血清群的致病性钩端螺旋体的兔抗体发生了特异性免疫反应。结论？？原核表达重组外膜脂蛋白rLipL32在致病性钩体血清群？之间有良好的交叉反应能力，可初步作为属范围内的钩端螺旋体抗体检测候选抗原。