热打击致大鼠肠上皮IEC-6细胞钙超载损伤的初步研究

目的　研究不同程度热打击对体外培养大鼠肠黏膜上皮细胞IEC-6的钙超载及钙超载相关的损伤。方法　设置培养IEC-6细胞的温度梯度，Fluo-3Am探针加荧光显微镜及流式细胞术观察细胞内钙离子水平的改变，相差显微镜观察细胞形态学改变，考马斯亮蓝染色法观察细胞骨架变化，CCK-8法观察细胞活性改变，黏附实验观察基底膜黏附性改变。结果　与正常对照组比较，热打击组细胞内钙水平上升(P<0.01)，呈温度依赖性。热打击组细胞形态变圆，伪足变短，细胞间隙增大，45℃较43℃改变更为明显。考马斯亮蓝染色显示，热打击组细胞骨架增粗、紊乱，出现应力性纤维，45℃较43℃改变更为明显。CCK-8法显示，热打击组细胞活性下降(P<0.01)，呈温度依赖性。基底膜黏附实验显示，热打击组基底膜黏附性显著下降(P<0.01)，呈温度依赖性。结论　热打击可造成IEC-6细胞钙超载，并造成与钙超载相关的一系列细胞损伤，热打击对于肠黏膜上皮钙超载的影响及其机制的进一步研究将有助于了解热射病的发病机制。