热打击对单层肠上皮Caco-2细胞屏障功能的影响

目的　研究热打击对肠黏膜屏障上皮细胞间紧密连接及凋亡的影响。方法　采用肠上皮细胞株Caco-2建立肠屏障模型，检测经37~43℃热打击后细胞的单层跨膜电阻抗(TEER)值及对大分子物质辣根过氧化物酶(HRP)的通透性，采用Westernblotting检测occludin蛋白的表达水平，AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果　随着热打击温度的升高，TEER值降低，HRP通透性增加，37℃热打击细胞的TEER值和HRP通透性与39、41、43℃热打击细胞差异均有统计学意义(P＜0.01)。热打击温度从37℃到41℃，occludin蛋白的表达逐渐增加，于41℃达峰值，此后逐渐下降。43℃时随热打击时间延长，occludin蛋白表达逐渐降低。随热打击温度(37~43℃)升高，细胞凋亡逐渐增加(P＜0.05或P＜0.01)。结论　热打击可造成肠上皮紧密连接的明显破坏，细胞凋亡增加，从而破坏肠屏障功能。