小肠黏膜下层的制备及其在心肌组织工程中的应用

【摘要】目的？制备小肠黏膜下层生物材料，并以其为支架材料体外构建工程化心肌组织。方法？？将猪小肠黏膜下层以0.25%胰酶和0.5%SDS各处理24h，制备出脱细胞小肠黏膜下层。用材料试验机沿平行或垂直于管腔的方向进行单轴拉伸，检测其力学性能，同时检测其细胞毒性和组织相容性，然后将3日龄新生大鼠心肌细胞接种于小肠黏膜下层支架上，体外构建工程化心肌组织薄片，倒置显微镜下观察。经Masson组织化学染色、肌节型肌动蛋白免疫组化染色和透射电镜观察对获得的心肌薄片进行评价。结果？小肠黏膜下层的力学性能良好，已经完全脱去细胞，无细胞毒性，组织相容性良好;接种12h后，心肌细胞开始在小肠黏膜下层上搏动，2d后心肌细胞-支架复合物（工程化心肌组织薄片）开始自发搏动，可搏动14d。构建的工程化心肌组织薄片由多层心肌细胞构成并有大量胞外胶原。结论？成功制备出力学性能和生物相容性良好的小肠黏膜下层生物支架材料，并以其为支架成功构建出工程化心肌组织薄片。