拟茎点霉ISSR-PCR反应体系的优化

旨在探讨TaqDNA聚合酶、dNTP、Mg2+、引物和模板DNA等因素对ISSR-PCR扩增的影响,采用单因子试验和正交设计方法相结合建立并优化拟茎点霉反应体系。在此基础上进行引物筛选,同时通过梯度PCR试验,确定引物的最佳退火温度。通过对19个拟茎点霉菌株的检验,结果表明已确立的体系稳定可靠,对不同模板均有较好的适用性和通用性,为利用ISSR技术对拟茎点霉进行遗传分析奠定基础。