OALib Journal期刊
过氧化氢诱导的奶牛乳腺上皮细胞氧化损伤模型的建立
DOI: 10.3969/j.issn.1006-267x.2014.12.014
Keywords: 奶牛乳腺上皮细胞 ,过氧化氢 ,氧化损伤模型
Abstract:
本试验旨在利用过氧化氢(hydrogenperoxide,H2O2)作为刺激源,以细胞存活率及抗氧化指标为判断指标,建立奶牛乳腺上皮细胞(bovinemammaryepithelialcells,BMEC)的氧化损伤模型.试验一采用单因子完全随机试验设计,将第3代贴壁生长的BMEC随机分为42组,每组10个重复.细胞培养液中分别添加0、100、200、400、600、800和1000μmol/LH2O2,使之分别作用2、4、6、8、12、24h,测定细胞数量,计算存活率.试验二是在试验一得出的适宜H2O2作用时间(本试验的结果为6h)的基础上,采用单因子完全随机试验设计,将第3代贴壁生长的BMEC随机分为7组,每组6个重复,BMEC中添加不同浓度的H2O2(0、100、200、400、600、800和1000μmol/L)作用细胞6h,收集细胞和培养液测定抗氧化指标,筛选使细胞发生氧化损伤的适宜H2O2作用浓度.试验一结果表明,600μmol/LH2O2作用细胞6h,BMEC的存活率降低至79.79%.试验二结果表明,600~1000μmol/L组与其他各组相比均显著降低了谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性,提高了丙二醛含量(P<0.05),但600、800和1000μmol/L组之间差异不显著(P>0.10).结果提示,H2O2作用浓度为600μmol/L、作用时间为6h,使BMEC产生了明显的氧化应激,可作为建立细胞氧化损伤模型时的适宜条件.
References
[1] 张斌,夏作理,赵晓民,等.氧化应激模型的建立及其评价[J].中国临床康复,2006,10(44):112-114. [2] 吴永霞,董国忠,贾亚伟.氧化应激对奶牛的危害及其防治[J].中国饲料,2011(4):32-35. [3] 胡菡,王加启,李发弟,等.高温诱导体外培养奶牛乳腺上皮细胞的应激响应[J].农业生物技术学报,2011,19(2):287-293. [4] 王振云.茶多酚对奶牛乳腺上皮细胞氧化应激损伤的保护作用[D].硕士学位论文.南京:南京农业大学,2011. [5] 韩飞,周孟良.过氧化氢诱导HepG2细胞产生氧化应激细胞模型的建立[J].食品科学,2011,32(5):55-57. [6] 彭亮,李知敏.紫萍提取物对过氧化氢诱导内皮细胞氧化损伤的保护作用研究[J].时珍国医国药,2009,20(4):996-998. [7] LIU Y,PETERSON D A,KIMURA H,et al.Mechanism of cellular 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) reduction[J].Journal of Neurochemistry,1997,69(2):581-593. [8] 文金隆.天麻酚性成分对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用研究[D].硕士学位论文.昆明:云南中医学院,2013. [9] HUO R,SHI Y,XU J J,et al.Antioxidant effect of human selenium-containing single-chain Fv in rat cardiac myocytes[J].Chemical Research in Chinese Universities,2009,25(2):216-219. [10] 孙婧陶,李兆华,张宝修,等.过氧化氢诱导延边奶山羊乳腺上皮细胞氧化损伤模型的建立[J].江苏农业科学,2013,41(10):149-152. [11] 周丽娜.野木瓜注射液及野木瓜提取物对H2O2氧化损伤神经元的保护作用[D].硕士学位论文.上海:上海师范大学,2011. [12] 齐晓龙,赵芹,张亚男,等.过氧化氢诱导产蛋鸡原代肝细胞氧化应激模型的建立[J].中国畜牧杂志,2013,49(11):49-52. [13] 郑延松,李源,张珊红,等.用低浓度过氧化氢建立心肌细胞氧化损伤模型[J].第四军医大学学报,2001,22(20):1849-1854. [14] SINET P M,GARBER P.Inactivation of the human CuZn superoxide dismutase during exposure to O2 and H2O2[J].Archives of Biochemistry and Biophysics,1981,212(2):411-416. [15] 杨家军,张敏红,冯京海.早期断奶对仔猪肠上皮细胞氧化与损伤的影响[J].安徽农业大学学报,2013,40(1):77-82. [16] 李永义.茶多酚对氧化应激仔猪的保护作用及机制研究[D].博士学位论文.雅安:四川农业大学,2011. [17] 齐晓龙.共轭亚油酸对产蛋鸡抗氧化机能的影响[D].博士学位论文.北京:中国农业科学院,2013. [18] 方允中,杨胜,伍国耀.自由基稳衡性动态[J].生理科学进展,2004,35(3):199-204. [19] 任泽林,霍启光,曾虹,等.氧化鱼油对鲤鱼生产性能和肌肉组织结构的影响[J].动物营养学报,2001,13(1):59-64. [20] 徐静.猪氧化应激模型构建以及茶多酚的抗应激效应的研究[D].硕士学位论文.雅安:四川农业大学,2009.
Full-Text
Contact Us
service@oalib.com
QQ:3279437679
WhatsApp +8615387084133
