RNA干扰酪氨酸激酶受体2对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的研究抑制酪氨酸激酶受体2（Tie2）对内皮细胞凋亡和增殖活性的影响。方法采用RNA干扰技术，将含有Tie2基因的特异性短发夹状RNA（shRNA）片段的质粒转染入人脐静脉内皮细胞（HUVECs），采用实时定量逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法检测细胞中Tie2mRNA和蛋白表达的改变；噻唑蓝比色分析（MTT）法检测细胞的生长情况；显微镜下观察细胞凋亡情况。以转染了pGenesil-hk质粒组为阴性对照，未转染质粒组为空白对照。结果质粒转染入HUVECs后，实验组细胞中Tie2mRNA和蛋白表达水平较阴性对照组和空白对照组下调，尤以转染后48hTie2的mRNA和蛋白表达水平下调更为明显（P<0.05）。MTT检测结果显示：实验组细胞的增殖活性受到明显抑制（P<0.05）。转染48h后，实验组的细胞凋亡率明显高于两个对照组（P<0.05）。结论RNA干扰技术沉默Tie2基因可致Tie2基因表达下调后诱导HUVECs凋亡，并抑制HUVECs的增殖。