毛囊bulge干细胞培养方法的比较研究

目的通过对限定性角质形成细胞无血清培养基（DK-SFM）和3T3滋养层培养毛囊bulge干细胞的比较，寻求既能方便获得大量毛囊bulge干细胞，又能减少其分化的理想培养条件。方法采用DK-SFM和3T3滋养层分别培养毛囊bulge干细胞，通过倒置显微镜观察毛囊bulge干细胞的形态，免疫荧光染色检测毛囊bulge干细胞的特异性标记细胞角蛋白19（CK19）和分化相关抗体群34（CD34）的表达鉴定毛囊bulge干细胞。通过比较2种方法培养的毛囊bulge干细胞的克隆形成率和CD34阳性率的差异，分别比较毛囊bulge干细胞的增殖能力和干细胞的数量，综合评估2种培养方法的优劣。结果倒置显微镜观察2种培养方法所得毛囊bulge干细胞均为铺路石状。免疫荧光染色检测2种培养方法培养的毛囊bulge干细胞CK19和CD34均呈阳性。DK-SFM和3T3滋养层培养的毛囊bulge干细胞克隆形成率分别为69.4%和62.2%。流式细胞仪检测DK-SFM培养的毛囊bulge干细胞中CD34阳性率为72.3%；3T3滋养层培养的毛囊bulge干细胞中CD34阳性率为34.7％。结论DK-SFM和3T3滋养层培养作为毛囊bulge干细胞的2种培养方法，均可以获得未分化的毛囊bulge干细胞。用3T3滋养层培养毛囊bulge干细胞的方法比较复杂，且所获的细胞混杂有3T3细胞，但用此种方法可获得大量的毛囊bulge干细胞。用DK-SFM培养毛囊bulge干细胞方法简单，但细胞不易贴壁，且数量较少，但能有效分离出较纯的毛囊bulge干细胞，保持较好的细胞活性。