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ISSN: 2333-9721
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桃果实PpPAE基因的原核表达载体构建与诱导表达

DOI: 10.7668/hbnxb.2014.02.004, PP. 18-21

Keywords: 桃,果胶乙酰酯酶,原核表达

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Abstract:

为构建桃果胶乙酰酯酶(PpPAE)基因的原核表达载体pET-32a(+)-PpPAE,并获得稳定高效表达的重组蛋白,以青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室前期获得的PpPAE基因(GenBank登录号KF017595)序列为依据,设计引物并扩增其cDNA片段,重组到原核表达载体pET-32a(+)中,将重组表达载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,并用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达产物。结果表明,已成功构建原核表达载体pET-32a(+)-PpPAE,重组质粒在0.1mmol/LIPTG浓度下诱导4h后,有大量融合蛋白表达,分子量约为64kDa。为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。

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