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H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶基因的表达及纯化
DOI: 10.7668/hbnxb.2008.05.023
Keywords: 禽流感病毒 ,H5亚型 ,神经氨酸酶(NA) ,原核表达
Abstract:
参考GenBank上发表的H5亚型禽流感病毒(AIV)神经氨酸酶(NA)基因序列设计引物，PCR扩增NA基因，再将其克隆到原核表达载体pET-32a中，用E。coliBL21(DE3)原核表达，SDS-PAGE和Western-blot对表达蛋白进行鉴定。Western-blot结果表明，表达产物具有免疫学活性，蛋白的分子量约为61kDa，位于包涵体中。包涵体经变性、复性处理，表达蛋白能与H5亚型AIV阳性血清发生特异性反应，具有良好的抗原性。ELISA检测结果表明，用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV神经氨酸酶抗体具有良好的灵敏性。
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