全部 标题 作者
关键词 摘要

OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
费用:99美元

查看量下载量

相关文章

更多...
同位素  2012 

放射敏感性启动子调控CD基因/5-FC自杀系统慢病毒载体的构建及125I诱导表达的研究

, PP. 165-170

Keywords: 125I,放射敏感性启动子,CD基因,GFP基因,慢病毒载体

Full-Text   Cite this paper   Add to My Lib

Abstract:

合成了含8个CArG元件的放射敏感性启动子E8,将其连接于胞嘧啶脱氨酶(CytosineDeaminase,CD)基因及GFP报告基因上游,构建了重组慢病毒载体pGC-FU-E8-codA-GFP。与慢病毒包装系统共转染293T细胞包装重组慢病毒颗粒E8-codA-GFPLV,研究重组慢病毒感染EJ细胞在不同剂量125I的电离辐射下绿色荧光表达情况及其将5-FC转化为5-FU的能力。结果显示构建的含有E8启动子及CD基因的重组慢病毒载体,包装的重组慢病毒滴度为2×108TU/mL;经125I照射的重组慢病毒感染EJ细胞均可观察到绿色荧光,其细胞上清液均可检测到5-FC转化成的5-FU紫外峰,其中55.5kBq及74.0kBq125I照射的细胞组绿色荧光明显,148kBq125I照射的细胞组,其5-FU紫外峰最为明显。以上结果表明本工作所构建的放射敏感性启动子调控CD基因/5-FC自杀系统重组慢病毒载体具有电离辐射调控作用,可在125I的电离辐射作用下诱导下游基因表达,为放射性核素125I联合CD基因/5-FC自杀系统对肿瘤细胞的治疗作用研究提供了实验基础。

References

[1]  王荣福,张春丽. 电离辐射诱导启动子Egr-1调控的基因放射治疗[J].肿瘤学杂志,2010,16(3):238-241.
[2]  Marples B, Scott SD, Hendry JH, et al. Development of synthetic promoters for radiation-mediated gene therapy[J]. Gene Ther,2000, 7(6): 511-517.
[3]  Scott SD, Joiner MC, Marples B. Optimizing radiation-responsive gene promoters for radiogenetic cancer therapy[J]. Gene Ther, 2002, 9(20):1 396-1 402.
[4]  Huber BE, Austin EA, Richards CA, et al. Metabolism of 5-fluorocytosine to 5-fluorouracil in human colorectal tumor cells transduced with the cytosine deaminase gene: Significant antitumor effects when only a small percentage of tumor cells express cytosine deaminase[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 1994, 91(17): 8 302-8 306.
[5]  Dropuli B. Lentiviral vectors: Their molecular design, safety, and use in laboratory and preclinical research[J]. Hum Gene Ther, 2011, 22(6): 649-657.
[6]  Danielsen S, Kilstrup M, Barilla K, et al. Characterization of the Escherichia coli codBA operon encoding cytosine permease and cytosine deaminase[J]. Mol Microbiol, 1992, 6(10): 1 335-1 344.

Full-Text

Contact Us

service@oalib.com

QQ:3279437679

WhatsApp +8615387084133