慢病毒介导的HPV16-E7基因RNAi细胞模型的建立

建立HPV16-E7基因的RNAi细胞模型，可为进一步研究HPV16-E7蛋白作用及致癌机制提供物质前提。选择HPV16-E7基因特异的siRNA片段，构建慢病毒siRNA重组表达载体，经293FT病毒包装细胞转染产生重组病毒，并以此感染HPV16阳性SiHa宫颈癌细胞、抗菌素筛选和分子生物学鉴定，建立了稳定表达HPV16-E7-siRNA的RNAi细胞模型。该细胞模型，对目标基因（E7）表达的抑制效率，也以蛋白免疫印迹和RT-PCR确证。由此得出，利用慢病毒载体和HPV16-E7基因特异的siRNA片段，可以建立一种稳定、有效和可行的RNAi细胞模型，为进一步研究E7蛋白的作用及致癌机制奠定了重要的物质基础。