新型乳酸固定化酶荧光毛细生物传感器

对长45mm、内径0.9mm的医用毛细管进行γ-氨丙基三乙氧基硅烷氨基化和戊二醛醛基化后,再将乳酸脱氢酶(LDH)的氨基与戊二醛的醛基结合,使其固定在毛细管内壁,构成一种新型固定化酶乳酸荧光毛细生物传感器(IE-LFCBS),实现了对乳酸的微量、快速测定.IE-LFCBS吸入辅酶Ⅰ与乳酸的混合液,在固定化酶催化下使乳酸与辅酶Ⅰ反应,生成荧光物质还原型辅酶Ⅰ;激发波长353nm、发射波长466nm.适用于IE-LFCBS的优化条件为:辅酶Ⅰ浓度4mmol/L、用于固定化的LDH浓度60kU/L、反应时间15min、反应温度38℃、测定范围为1.0～5.0mmol/L、回收率95%～98%,IE-LFCBS的相对标准偏差为RSD<1.5%(n=11),检出限为0.45mmol/L.IE-LFCBS的试液用量极少(18μL),并能重复使用,可望用于发酵食品、药品、血液标本等各类样品中乳酸的快速检测.