CD147对体外破骨细胞分化成熟的影响

目的建立破骨细胞（osteoclasts，OCs）体外分化成熟的模型，研究CD147对OCs分化成熟的影响。方法从外周血分离单个核细胞贴壁培养，使用破骨细胞分化因子(receptoractivatorofnuclearfactor-κβligand，RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(macrophagecolonystimulatingfactor，M-CSF)诱导OCs生成。实验分为对照组、诱导组（RANKL+M-CSF）及阻断组（RANKL+M-CSF+CD147Ab），应用免疫荧光染色和流式细胞术检测CD147在破骨前体细胞（osteoclastprecursorcells，OPCs）的表达；抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistantacidphosphatase，TRAP)染色观察OCs的分化成熟情况及Real-timePCR技术检测CD147及TRAPmRNA在OPCs中的表达变化。结果①CD147分子在OPCs细胞膜上表达。②流式细胞术测得细胞膜表面平均荧光强度对照组（159.55±1.65）、诱导24h组（171.18±3.46）、诱导48h组（178.47±4.59）逐渐增强（P<0.05），而阻断24h组（117.69±9.01）显著减弱（P<0.01）。③阻断组TRAP染色阳性细胞（细胞核≥3）数显著少于诱导组（P<0.01），且OCs体积小。④在24、48h诱导组CD147mRNA相对表达量[(1.393±0.248)、(1.772+0.326)]及TRAPmRNA的相对表达量[(1.810±0.398)、(2.608±0.906)]在OPCs诱导分化过程逐渐增高，均高于相应时相点阻断组（P<0.05）；且TRAPmRNA相对表达量与CD147mRNA相对表达量呈正相关（r=0.833，P<0.01）。结论CD147分子在OPCs细胞膜上表达且参与OCs分化成熟;抑制CD147的表达,OCs出现成熟障碍。