全部 标题 作者
关键词 摘要

OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
费用:99美元

查看量下载量

相关文章

更多...

兔角膜缘干细胞的体外培养、鉴定及形态学特点

, PP. 1762-1765

Keywords: 角膜缘干细胞,细胞培养,体外,生物学特性

Full-Text   Cite this paper   Add to My Lib

Abstract:

目的体外培养兔角膜缘干细胞(limbalstemcells,LSCs),观察其生物学特性。方法用含20%胎牛血清DMEM∶F12(1∶1)培养基对兔LSCs进行体外培养,倒置显微镜及HE染色观察培养细胞体外生长的形态,免疫细胞化学AE5和P63染色鉴定并进行图像分析,透射电镜观察超微结构特点。结果培养2~3d细胞从组织块游出,6~8d形成良好的单层,细胞多呈圆形或卵圆形。电镜观察,培养7dLSCs呈卵圆形,表面有少量微绒毛突起;胞质内细胞器少,核大,核仁明显,核浆比例大,部分细胞可见双核现象。免疫组化观察,培养第7天,大量细胞AE5免疫反应染色呈阴性,阳性细胞数量较少,大量细胞P63免疫反应染色呈阳性;培养第14天,AE5阳性细胞数明显增多,免疫反应染色增强,阳性细胞的平均灰度值显著降低(7d:184.30±9.85,14d:133.36±25.00,P<0.01)。P63免疫反应阳性细胞数第14天与第7天相比明显减少,而阳性细胞的平均灰度值显著增高(7d:108.13±17.96,14d:177.59±7.86,P<0.01)。结论应用组织培养方法获得的原始细胞具有与体内正常LSCs相一致的形态特征;培养第7天为LSCs生长的峰值期。?

References

[1]  苏敏, 肖莉, 黄悦, 等. 兔角膜缘干细胞的体外培养、鉴定及形态学特点[J].第三军医大学学报,2010,32(16):1762-1765.
[2]  易斌,钱桂生,白莉,等.不同方法培养大鼠肺动脉平滑肌细胞的差异[J].第三军医大学学报,2005,27(24):2425. [2]夏珊,李世荣,刘剑毅,等.大黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖抑制及细胞内游离Ca2+的作用[J].第三军医大学学报,2007,29(20):1982.  XIA Shan,LI Shi-rong,LIU Jian-yi,et al.Effect of emodin on proliferation and intracellular free calcium of hypertrophic scar fibroblasts in vitro[J].J Third Mil Med Univ,2007,29(16):1982. [3]桂伶俐,张传汉,刘志恒,等.不同胚龄人神经前体细胞分离培养及分化特性的比较[J].第三军医大学学报,2007,29(15):1469.  GUI Ling-li,ZHANG Chuan-han,LIU Zhi-heng,et al.Culture and differentiated characteristics of human neural progenitor cells derived from embryonic brains of different ages[J].J Third Mil Med Univ,2007,29(16):1469. [4]路菊,赵建华,郭乔楠,等.细胞与生物材料共培养的样品扫描电镜制备法[J].第三军医大学学报,2007,29(14):1446. [5]王向军,余正星,谢汉平,等.兔健眼角膜缘干细胞取材安全范围的实验研究[J].第三军医大学学报,2007,29(10):955.  WANG Xiang-jun,YU Zheng-xing,XIE Han-ping,et al.Experimental study on safety margin of harvesting limbal stem cells from the healthy eyes in rabbit[J].J Third Mil Med Univ,2007,29(16):955. [6]王丽雁,蔡文琴,陈鹏慧.新生大鼠少突胶质前体细胞的培养与鉴定[J].第三军医大学学报,2008,30(06):489.  WANG Li-yan,CAI Wen-qin,CHEN Peng-hui.Isolation and identification of oligodendrocyte progenitor cells from neonatal rats[J].J Third Mil Med Univ,2008,30(16):489. [7]刘志能,姚珍薇,唐良萏,等.异位和正常子宫内膜间质细胞对上皮细胞间隙连接细胞间通讯的影响[J].第三军医大学学报,2007,29(20):1972.  LIU Zhi-neng,YAO Zhen-wei,TANG Liang-dan,et al.Influence of ectopic and normal endometrial stromal cells on GJIC in epithelial cells in vitro[J].J Third Mil Med Univ,2007,29(16):1972. [8]刘恺鸣,迟路湘,鲁向辉,等.大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养[J].第三军医大学学报,2007,29(20):2011. [9]李捷,张宜明,刘颖,等.抗坏血酸诱导体外培养小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞[J].第三军医大学学报,2008,30(18):1722.  LI Jie,ZHANG Yi-ming,LIU Ying,et al.Ascorbic acid induces mouse embryonic stem cells to differentiate into cardiac myocytes[J].J Third Mil Med Univ,2008,30(16):1722. [10]季亢挺,张怀勤,杨鹏麟,等.不同细胞生长因子组合对培养的内皮祖细胞集落形成及黏附能力的影响[J].第三军医大学学报,2006,28(24):2468.

Full-Text

Contact Us

service@oalib.com

QQ:3279437679

WhatsApp +8615387084133